伤口愈合实验（Wound healing assay）是一种操作简单、经济实惠的研究细胞迁移/肿瘤侵袭的体外试验方法，在SCI论文中得到了广泛的使用【1】。
如何分析划痕实验结果却令很多人头疼！划痕实验常见的统计指标是统计伤口愈合百分比（Wound healing percentage）和划痕宽度。伤口愈合百分比本质上是一种面积分析，半夏在往期已经给大家分享过30秒搞定划痕面积分析，有兴趣的童鞋可以自行查看！
划痕面积的基本分析步骤为：对划痕图片进行Process -> Smooth平滑后进行Process -> Find Edges寻找边缘，再使用Image -> Adjust -> Threshold，阈值选定后进行划痕面积分析：
手动画线起点和终点欠精确；添加的等距水平线数量有限，得到的平均宽度不准确；工作量大，浪费时间。
01、基础知识准备
(1)灰度值灰度值纯黑为0、纯白为255：
（2）Plot Profile
Plot Profile（快捷键 Ctrl+K）见于Analyze -> Plot Profile，适用于线和矩形选框，表示线段和矩形选框所经过的范围内的灰度变化（荧光强度），如下图：
Plot Profile常用于定性表示荧光共定位【2】与矩形范围内荧光强度变化【3】：
02、划痕宽度分析
（1）划痕面积分析
1. ImageJ打开待分析划痕图片，先通过Image -> Type -> 8-bit将图片格式转化为8-bit灰度图片，再通过Process -> Smooth将图片进行平滑处理，最后点击Process -> Find Edges寻找边缘：
2. Process -> Filters -> Gaussian Blur…Sigma设为6，对图片进行模糊处理：
3. Image -> Adjust -> Threshold，按照自己需要调整适合的阈值，调整合适后点击Apply：
利用对二值化图片进行Plot Profile操作，我们便捷、准确的获取了划痕对应的每一个像素的宽度，这提示我们在日常的科研生活中应该勤于思考、做到举一反三！今天的给大家分享ImageJ高效分析划痕宽度就到此为止了，希望对大家有所帮助！
在科研界的江湖中，流传着一大神器—— ImageJ，堪称数据图像分析处理的“倚天剑”。
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